中试型全自动多肽合成仪是一种高效、自动化的设备，广泛用于多肽合成的中试、生产、科研等领域。
它可以根据预定的合成条件，自动完成多肽的合成过程，减少人为操作，提升合成效率和可重复性。
以下是中试型全自动多肽合成仪的一般使用方法。
一、准备工作
在开始使用合成仪之前，需进行以下准备工作：
1.检查设备
（1）确认设备各部分连接完好，特别是反应釜、进料管路、废液排放系统等。
（2）检查设备电源、气源是否正常，并确保没有异常警告或故障显示。
2.准备化学试剂
（1）氨基酸保护试剂（如Fmoc氨基酸、Boc氨基酸等）。
（2）氨基酸活化试剂（如DCC、HBTU、EDC等）。
（3）溶剂（如NMP、DMSO、二氯甲烷等）。
（4）催化剂和试剂（如二氯化钴、TFA等）。
（5）保护剂（如氨基保护基团，Fmoc、Boc等）。
（6）去除试剂：用于去除保护基团的试剂，如0.1M氨基酸溶液、TFA（三氟乙酸）、DBU等。
3.清洗设备
（1）使用适当的溶剂（如二氯甲烷、乙醇、丙酮等）清洗反应釜、管道和相关配件，确保没有残留物质。
二、设置合成条件
根据合成要求，设置合成仪的工作参数：
1.选择合成方法
（1）选择适合的合成模式（如Fmoc法、Boc法等）。
（2）选择合成所需的氨基酸序列、保护基团、去除保护基团的时间和温度等。
2.输入合成参数
（1）在设备的控制界面（如触摸屏或PC软件）中输入合成所需的氨基酸序列及其顺序。
（2）输入反应条件，包括氨基酸加入量、溶剂类型、氨基酸活化剂的添加时间、去除保护基团的时间和温度等。
（3）设置合成周期，包括加药时间、反应时间、清洗时间等。
3.选择合成规模
（1）输入合成的规模（如合成量通常在mg级至g级之间）。
4.设定溶剂和试剂的添加量
（1）根据合成的规模和合成方案，设定每个步骤所需的溶剂和试剂量。
三、启动合成
启动合成程序后，合成仪会根据预定的程序自动完成整个合成过程。
1.合成过程
（1）固相合成：合成仪首先将氨基酸连接到固相载体（如树脂）上。
每次合成后，自动去除保护基团并洗涤。
（2）氨基酸添加：合成仪会自动按顺序添加氨基酸和活化剂，执行一步一步的加成反应。
（3）去保护基团：合成过程中，保护基团会在指定条件下去除。
一般使用TFA溶液和催化剂进行去除。
（4）清洗步骤：每完成一个合成步骤后，合成仪会自动清洗反应釜，以去除多余的溶剂、试剂和副产物。
2.反应监控
（1）设备通常会有实时监控系统，可以检测反应釜内的温度、压力、溶剂流量等参数。
确保合成过程中反应条件稳定。
（2）可以根据需要调整反应速率和反应时间，确保反应完全。
四、合成结束后的处理
合成结束后，仪器会自动停止并提示操作人员进行后续处理：
1.去除反应物：使用适当的溶剂（如二氯甲烷、乙醇等）去除树脂，获得粗产物。
需要用去除保护基团的试剂（如TFA）对产物进行脱保护处理。
2.清洗仪器：合成完成后，必须彻底清洗反应釜和其他管路，避免试剂残留和交叉污染。
3.产品纯化：多肽合成完成后，需要进行纯化，通常采用高效液相色谱（HPLC）进行分离和纯化。
五、数据记录与分析
大多数中试型全自动多肽合成仪配有计算机控制系统和数据采集系统，能够记录每一步的反应参数（如温度、时间、溶剂用量等）。
1.数据存储：自动保存每次合成的过程数据、合成结果以及反应条件，便于分析和追溯。
2.质量控制：在合成后，可通过质谱、HPLC等手段对产物进行质量控制，确保合成的多肽符合要求。
六、注意事项
1.试剂的安全性：部分试剂（如TFA、DCC、HBTU等）具有一定的危险性，操作时要佩戴适当的防护装备，工作环境要通风良好。
2.设备维护：定期清洗和维护合成仪器，确保其性能稳定，避免设备故障影响合成过程。
3.准确性：确保输入的合成参数和条件准确，避免错误的操作导致产物不合格。
4.废液处理：合成过程中产生的废液（如TFA废液等）需要按照安全规定妥善处理。
七、总结
中试型全自动多肽合成仪能够大大简化多肽合成过程，提高合成效率和可重复性。
合理的合成设置、准确的试剂配比以及设备的良好维护是保证合成质量的关键。
按照上述步骤进行操作，能够高效、安全地完成多肽合成任务。
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